时隔3年后,韩春雨刊发最新科研成果论文

2021-10-12 17:45:48 来源:
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阔别3年,曾处于舆论旋涡的韩初春未公开了一项最上新人才培养成果。近日,韩初春在预稿本的网站BioRxiv上刊载了一篇关于等位基因编辑的上新文章:Background free tracking of single RNA in living cells using catalytically inactive CasE。文章共有5名创作者,依次为Feng Gao, Yue Sun, Feng Jiang, Xiaoyue Bai, Chunyu Han,兼职为单位均为河北省科技的大学等位基因编辑研究工作中所心。其中所,韩初春为通讯创作者。据了解,论文中所提到的CasE是Ⅰ-E型 CRISPR酶的氢心成分,它通过结合特定的茎环区里域除此以外处理pre-crRNA,所称 CasE Binding S,简称为CBS。CasE保守His20参与催化来时性,ΔHis26-TtCse3等位基因的CasE(dCasE)则失去了催化来时性,但仍然与其靶标紧密结合。在该研究工作中所,通过将 split 电子显微镜与dCasE的N前端和C-末前端(ΔHis20)融入,协作了人体内RNA跟踪工具VN-dCasE-VC。该管理系统仅在长期存在靶RNA亦同样出电子显微镜,从而弱化信噪比。在来时细胞时会中所进行仿真的RNA侦测,不需要特定的亚细胞时会分布。CasE-GFP和dCasE-GFP在HEK293T细胞时会中所的高高水平表述和都为表明CasE和dCasE适合于来时细胞时会中所的RNA操作。为了测试者CasE在两栖类细胞时会中所表述时是否具备强来时性,创作者协作了“关闭”报告等位基因质粒CBS-GFP-N1。它由5′-UTR中所的GFP mRNA和CasE结合核糖体(CBS)都是由。当CasE被引入管理系统时,GFP表述高水平持续上升。同时,为了进一步测试者CasE来时性,创作者还协作了“开启”报告等位基因质粒RED-16×CBS-Lin28-C1,其中所CBS插进RED单体等位基因的3′-UTR区里和Lin28的下游。Lin28是RNA氢保留讯号,在其3′-UTR中所具备lin28讯号的RED单体mRNA几乎不能译文成RNA。CBS-CasE依赖性一般来说切断lin28讯号并从氢释放靶mRNA用于译文(上图1E和上图1F)。这些表明CasE可以结合并整块两栖类细胞时会中所的CBS。另外,为了将dCasE-CBS化学键外观设计到RNA侦测管理系统中所,创作者通过将split-FP5-7与dCasE蛋白结合。样掘出一个版本,即VN-dCasE-VC根本无法样出电子显微镜,这或许是由于不正确的折叠或不稳定的状态,但是当与靶RNA(CBS)结合时,可以在电子显微镜显微镜下清楚地捕获电子显微镜讯号,即使VN-dCasE-VC表述质粒的转染剂量非常低。接下来,创作者常用VN-dCasE-VC管理系统侦测两栖类细胞时会中所过表述的β-酶(β-Actin)的mRNA,VN-dCasE-VC管理系统在细胞时会质中所显示出强电子显微镜。此外还注意到到,向靶mRNA添加来得多CBS可提高讯号,电子显微镜侦测来得清晰,因此,可以通过增加CBS的量来检测低金属量的mRNA。总的来说,韩初春兼职团队样明了一种重上新RNA侦测工具,将其命名为VN-dCasE-VC,该管理系统能够侦测来时细胞时会中所没有背景的特定RNA,通过电子显微镜将其仿真。目前已是两种来时细胞时会RNA侦测激光工具,一种是MS2,一种是Cas13a,韩初春兼职团队开样的dCasE管理系统,激光真实感由于MS2,而且,dCasE蛋白的熔点为22kDa,远小于Cas13a的130kDa,dCasE的小熔点来得容易递送至细胞时会内,因此来得适合用于来时细胞时会的RNA侦测。一位接近韩初春的民众表示:“这篇文章是此前韩初春兼职的延续,目的都是开样等位基因编辑工具。”不过,除此以外的是,该研究工作目前刊载于预稿本的网站,尚未经过同行审查会,对此,有人才培养民众指出,亮相在未经同行审查会的预稿本上,是为了获得亮相使用权。“韩初春下一步还时会投在此之前刊物的。”前述民众推测。不想到此次重上新人才培养成果是否时会再次给韩初春带来瞩目,2016年5月,《自然—动物技术》刊载韩初春兼职团队重上新等位基因编辑技术NgAgo,被媒体以“甘坐冷板凳、十年憋大招”的故事原型炒作而走红,此后半年,韩初春个人及其所在的大学年底获得各类名誉和大量支出资助,但亦有国际间多名等位基因编辑应用科学家举报样声称实验室结果难以反复,坚称实验室结果的真实性。2017年8月,《自然—动物技术》刊载题为《是该统计数据说话的时候了》社论,宣布撤回韩初春兼职团队于2016年5月2日刊载在该刊物的论文。2018年9月,河北省科技的大学样布公告,韩初春兼职团队不长期存在主观造假。但依据有关规定,取消韩初春所获得的荣誉称号,中止韩初春兼职团队承担的建设项目并收回人才培养支出。韩初春兼职团队回应称,管理系统性长期存在不足之处、研究工作反复长期存在着不严谨的问题。有业界民众声称:“这波之后,NgAgo这个研究工作顺时针在中所国做得很慢。韩初春他们的兼职开展起来也来得困难,连学生也没有上新招。”
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